葛瑞森(夜班主管)╱William Petersen 飾

拉斯維加斯CSI部門的夜班主管，也是一位鑑識昆蟲學家，曾在UCLA獲得生物學學位。葛瑞森通曉手語，也遺傳了他媽媽的耳疾，這讓他逐漸失去聽力，在第三季中成為劇情主線之一，之後他進行了治療手術及恢復，但此事只是一筆帶過並沒有播出。他的嗜好包括他的工作、賽蟑螂、閱讀古典文學（包括拼字遊戲）、與雲霄飛車。

他的團隊是由四個主要的CSI幹員所組成，加上一組技術人員從旁協助。第五季中期原始夜班人馬曾被拆散，但第五季最後因尼克身陷葬身危機後，葛瑞森向艾克利要求他的人馬全回到夜班，故第六季所有主角便回到夜班出勤，而第五季中為葛瑞森隊員的蘇菲亞，調職為警探，後在拉斯維加斯警局刑案組繼續和CSI合作。

　凱薩琳(血液飛濺分析師)╱Marg Helgenberger 飾

入職前當過脫衣舞女郎，在前四季是夜班副主管，當葛瑞森出城或是因為其他理由休假時，由她來代理主管職務。第五季開始，她向行政單位申請升遷為日班組長，並請葛瑞森推薦，中期她奉命調到新成立的午班擔任主管，與尼克、華瑞克團隊。第六季後則回到夜班重作葛瑞森副手。

凱薩琳為了支付修習醫工學程的學費，曾經當過脫衣舞者。有一個小女兒，名叫Lindsey。很不幸的是，在前夫慘遭謀殺後，她無法找到足以將殺人兇手定罪的證據。在第三季最後一集「失控」（Inside the Box），凱薩琳發現她的生父是聲名狼藉的賭場所有人以及謀殺嫌疑犯山姆•布朗。

華瑞克(影音分析師)╱Gary Dourdan 飾

華瑞克是個土生土長的拉斯維加斯人，在內華達州立大學拉斯維加斯分校（UNLV）主修化學。他有賭隱問題，在第一季有一個主題就是此為主。他是葛瑞森夜班團隊的一員，不過在第五季中期轉到了韋羅斯的午班團隊。

因為見到同伴尼克在第五季最後兩集的事件，感嘆世事無常，便與交往不久，在醫院擔任醫生的新女友蒂娜（Tina）閃電結婚，在第六季回到葛瑞森團隊，出場時便戴上婚戒，讓凱薩琳為之震驚，並在後來凱撒琳向他解釋她對他有好感，他結婚了讓凱薩琳有夢想幻滅的惆悵。

尼克(毛髮纖維分析師)╱George Eads 飾

尼克來自德州達拉斯，是個隨和友善的前兄弟會成員，具有刑事審判學位。他在前四季是葛瑞森團隊的一員，在第五季中期轉到了韋羅斯的午班團隊，後期則在名導演昆汀塔倫提諾所受邀執導的特輯「葬身」兩集中成為事件受害者，獲救後，也藉此讓CSI團隊在第六季中全部重返夜班。

尼克除了對犯罪證據的研究細心外，更重視與人之間的互動，因此在第四季中期他重開與葛瑞森曾共同辦案的事件中，獲得新的事證進而與葛瑞森意見不同時，獲得葛瑞森賞識拔昇為CSI小組長，但卻因為局內預算將其職位取消的關係未能晉升。第五季最後兩集，被迷昏成為受害者，並慘遭活埋，最後在CSI全體出動下順利救出。第六季後回到夜班。

莎拉(材料與元素分析師)╱Jorja Fox 飾

莎拉在哈佛大學主修物理學，原本在舊金山的驗屍與犯罪研究室工作，然後被葛瑞森挖角過來。。她自小在一個充滿著暴力與虐待的家庭中成長，在她媽媽殺了她爸爸之後，被送進了輔育機構。她有時候會對她的工作注入太多個人情感，特別是當受害者是婦女的時候。而這些令人不悅的細節直到第四季後期才開始揭露，後來她也變成了一個酒精中毒者。劇情在她得知葛瑞森只推薦尼克為小隊長而不是她之後酒駕被抓而達到高潮。

隨著第五季的劇情發展，她的問題不限於此僅這一點也越來越明顯，她也開始顯露出犯上（insubordination）與對證人有明顯敵意的跡象。

她對葛瑞森的感覺遠遠多於對一個上司，他們倆的關係在第七季以後更加明顯，也成為影迷關注的動向。

葛瑞格(實驗室技師)╱Eric Szmanda 飾

葛瑞格非常崇拜葛瑞森，且嚮往成為CSI組員，與伙伴一同前往現場採證。他在第四季中向葛瑞森申請轉調，經過幾次考驗，在第五季鑑識福爾摩斯懸案（511）時的細心查案，終於成為CSI組員，並且加入了葛瑞森的夜班團隊。

葛瑞格是資優生，對生物化學非常在行，同時他也和年輕男生一樣，喜歡玩電玩，看色情雜誌，更喜歡在實驗室搞怪、講冷笑話，雖然討厭文學，但要是有談到屍體與謀殺的小說他也會看。

艾爾(法醫、驗屍官)╱Robert David Hall 飾

驗屍官，已婚，有三個小孩，經常只有他了解葛瑞森。其中現實世界Robert的雙腳因車禍而截肢，因此雙腳是義肢，他的興趣是在搖滾樂團演奏。

吉姆(重案組隊長)╱Paul Guilfoyle 飾

原為CSI部門的主管，不過在首集最後因新組員荷莉（Holly Gribbs）在犯罪現場遭兇手殺害，被調任重案組，成為重案組的隊長，是一位出色且負責的警探。常常和CSI團隊合作，第六季中因在槍戰中誤殺同袍，他的內心留下了難以釋懷的過去，並在在第六季末差點命喪黃泉。

（圖文：AXN提供）